PCR专题培训考核 - 在线考试测评模板

Q1:姓名

填空1

Q2:关于PCR说法正确的是

荧光PCR方法唯一发光物质是荧光探针

荧光PCR应用定量参考品能够做到绝对定量

引物和探针是决定PCR检测项目的主要物质

PCR反应主要应用的是Taq酶的外切没活性

Q3:关于和实生物HPV分型以下说法正确的是

主要应用的是多重检测的技术

使用的是荧光分型技术

使用的是非对称扩增技术

体系中一共有19条探针

Q4:PCR的主要过程描述错误的是

50℃3min反应主要作用是激活UDG酶，消除气溶胶污染

Taq酶的最适延伸温度一般为72℃

退火温度一般在50-60℃

PCR过程中一般引物比探针先结合到模板上

Q5:对于阈值线定义正确的是

阈值线是荧光曲线最初的平滑区段，一般设置3~10

在扩增曲线的指数增长期适当位置上设定的荧光检出界限

阈值线的位置可以人为随意设定

荧光扩增中荧光信号达到设定荧光值时经历的循环数

Q6:和实生物PCR反向点杂交技术中描述正确的是

生物素标记一般标记在探针上

一般把扩增产物固定在膜上，加入探针进行检测

引物探针结构和荧光PCR是一致的

在扩增过程中引入标记物，从而生成带标记的扩增产物。

Q7:关于染料荧光PCR法说法正确的是

可以做4种不同的荧光标记

应用场景和探针法一致

结合在双链上时会发出荧光

是和目的基因互补的小分子

Q8:关于基因型分型的说法正确的是

基于不同亚型相同的保守区域进行设计和检测

靶基因设置和其他基因相似时，有可能会引起非特异性检测

电泳法鉴定主要是根据不同核酸片段带电性不同来进行区分的

熔解曲线方法无法进行基因分型检测

Q9:关于探针类型以下说法错误的是

水解型探针需要搭配有外切酶活性的Taq酶使用

分子信标的长度一般都比水解性探针要长

MGB探针理论上能够鉴别出1个碱基的错配

MGB基团能够在相同TM值情况下设计更短的探针，提高准确性和特异性，因而越短的探针越好

Q10:基因突变检测说法正确的是

对应的突变基因和野生型基因互为等位基因

只有癌症患者身上才会发生基因突变。

基因突变阴性患者提示没有检测出该基因

EGFR突变只在肺癌中检出

Q11:关于非特异，以下说法正确的是

可以通过UDG酶消除

主要是因为基因错配引发的

通过降低退火温度可以有效降低非特异情况

RNA比DNA更容易发生非特异情况

Q12:PCR如何有效提高检出率

提高进样浓度

提高退火温度

提高循环数

提高试剂灵敏度

Q13:基因分型主要应用的技术是

不同探针，标记不同的基团来区分不同亚型

不同的退火温度，导致不同的熔解峰来区分不同亚型

不同靶标片段大小，区分不同亚型

通过不同靶标的不同基因序列鉴定来区分不同亚型

Q14:和实生物PCR显色法的检测原理正确的是

应用的是恒温扩增技术

利用反应前后体系酸碱度变化指示颜色变化判读

容易受样本本身的酸碱环境影响

应用荧光探针技术发光检测

Q15:染料法荧光检测和分子信标荧光检测正确的是

染料法价格高昂，所以普及度不高

染料法是非特异性荧光

分子信标是特异性荧光

分子信标能做高通量荧光熔解曲线

Q16:关于PCR定量说法正确的是

HPV荧光探针法可以通过标准品来实现定量结果

国家推荐HPV做定量检测

HPV28分型可以通过斑点颜色来确定样本浓度

一般与样本浓度与病情进展相关的项目才会开展定量检测

Q17:以下概念正确的是

CT值越大，浓度越大

杂交时间越长，灵敏度越高，结果越准确

荧光分析中，选取平滑的循环区段本底作为荧光分析的基线

基因突变检测，用△CT来判读阴阳，以排除等位基因非特异扩增干扰

Q18:多重荧光检测以下说法正确的是

引物探针之间容易引起错配，引起假阳性扩增

探针数量，荧光标记比常规试剂多，因而本底荧光较高

可以通过优化共用引物探针的方法提升试剂的检测效果

可以通过一个样本同时进行多种病原体的检测分析

Q19:关于基因突变和封闭剂的说法正确的是

在突变位点对应的野生位点上设计探针对野生型进行封闭，提升突变检出的准确性

封闭探针在3’端添加基团，以免野生型发生扩增检测

引物的3’端一般设计在突变位点处，保证突变位点扩增的准确性

对照点和突变点一般是PCR效率相同的。

Q20:关于内标的说法正确的是

内标分为内源性和外源性，内源性为样本自带，外源性为人工合成

内标的作用是用于监控当前样本的在当前试剂下的扩增效率

和实生物HPV28分型中CC点为内标监控点

内标不出，出来阳性结果能够正常判读阳性

Q21:关于引物和探针说法正确的是

引物和探针在设计上间隔在3~5个碱基

探针设计一般比引物设计的TM值高

在荧光探针法体系中一般在探针中添加基团

在点杂交体系中一般在引物上添加基团

Q22:HPV3S4S应用的是多重荧光检测技术

是

否

Q23:玻璃化的反应体系能够在室温下运输

是

否

Q24:石蜡封盖剂和单管单人份是以物理分隔的模式在单个反应管中把整个体系分成了反应液和酶系两大传统大包装组分。

是

否

Q25:和实生物显色法试剂颜色变化的主要作用组分是SYBR Green

是

否

Q26:基因突变检测中，野生型突变位点翘尾是因为等位基因太相似引起的非特异性扩增引起的，是客观存在的现象，只要△CT在判读规则以外，则是正常。

是

否

Q27:就荧光多重检测和杂交多重检测简述各自的原理特点，并分析两者各自的优劣势。

填空1